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所在地:北京
型號(hào):HR8963
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更新時(shí)間:2023-11-21
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骨組織快速脫鈣液III
產(chǎn)品編號(hào):HR8963
保存條件:RT避光,有效期1年。
產(chǎn)品說(shuō)明:
骨組織快速脫鈣液III在組織切片過(guò)程中,一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時(shí),含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同,較難切出完整的切片。對(duì)含鈣組織最好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游操作如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。
用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機(jī)酸、無(wú)機(jī)酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解脫鈣。EDTA是一種常用的螯合脫鈣劑,對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,經(jīng)EDTA 脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是由于EDTA法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
骨組織快速脫鈣液針對(duì)EDTA脫鈣的缺點(diǎn),采用優(yōu)化的配方,將脫鈣速度提高到1-2天。骨組織快速脫鈣液主要由甲醛、甲酸、稀酸等組成,脫鈣快速,對(duì)組織的結(jié)構(gòu)損害小,脫鈣完全。該脫鈣液適合病理特殊骨組織標(biāo)本脫鈣,如果在脫鈣前對(duì)組織固定,效果更好。
骨組織快速脫鈣液特別適用于骨組織標(biāo)本的脫鈣,但不宜用化學(xué)方法確定脫鈣終點(diǎn)。
試劑盒以外自備試劑和儀器:
● 蒸餾水 ● PBS ● 加熱裝置或微波爐
注意事項(xiàng):
● 厚度5mm的骨組織脫鈣時(shí)間一般為24-36h;
● 適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過(guò)37-40℃;
● 溫度過(guò)高易導(dǎo)致骨組織松散解體,尤其不可高于60℃;
● 脫鈣應(yīng)徹底,防止脫鈣不足或過(guò)度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間,以免脫鈣時(shí)間過(guò)長(zhǎng)引起組織損傷;
● 脫鈣用具盡量使用玻璃容器,避免金屬容器;
● 骨組織脫鈣應(yīng)先固定,然后再脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行;不應(yīng)脫鈣后再固定,以減少對(duì)組織的損傷;
● 每隔一段時(shí)間檢查下脫鈣程度;脫鈣過(guò)度會(huì)增加組織的損傷,影響染色結(jié)果。
骨組織快速脫鈣液III使用方法:
以下方法僅供參考,根據(jù)實(shí)際樣本和參考文獻(xiàn)情況進(jìn)行調(diào)整。
1、骨組織脫鈣時(shí),取材不易過(guò)厚,一般大約5mm;
2、組織固定后,用PBS清洗3次,每次20min;
3、組織用蒸餾水清洗3次,每次20min;
4、將組織移至20-30倍體積的快速脫鈣液中,脫鈣24-36h;如想加快脫鈣速度,可置于37℃進(jìn)行脫鈣;
5、蒸餾水沖洗數(shù)次;
6、常規(guī)脫水,包埋。
脫鈣終點(diǎn)的測(cè)定(物理方法):
采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當(dāng)骨組織變軟或針刺時(shí)沒(méi)有阻力感即可終止脫鈣。
物理檢測(cè)會(huì)對(duì)組織結(jié)構(gòu)有一定的損害,盡量避免用力過(guò)大或反復(fù)檢測(cè)。