大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒說明書

上海時代生物科技有限公司在廣大科研用戶的幫助和支持下，經(jīng)過多年不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)試劑的國際運(yùn)營商之一，代理許多國際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷，儀器儀表等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。

在飛速發(fā)展的今天，科研已成為一個時代進(jìn)步的標(biāo)志。在人們致力于科研的同時，我們也致力為行業(yè)鍛造一個更好的技術(shù)服務(wù)體系和更全面渠道支撐體系，而這恰恰是我們行業(yè)健康發(fā)展的重要條件和未來的目標(biāo)。我們一直關(guān)注著生物行業(yè)的發(fā)展，致力于為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)的服務(wù)，上海時代生物科技有限公司立足上海，面向全國，真誠希望與每一位顧客建立良好的合作關(guān)系。

我們的服務(wù)理念："一切以誠信為本，一切以用戶價值為依歸！為顧客提供售前、售中、售后的全方位服務(wù)，不求最好，只為更好。"

 

公司致力于為廣大科研用戶提供Elisa產(chǎn)品應(yīng)用方案，努力追蹤世界前沿的生物科技,為客戶提供更完善的產(chǎn)品線,歡迎來電咨詢!  

本說明書僅供參考，以公司現(xiàn)時提供為準(zhǔn)，敬請來電索取。本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。

大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)定量檢測試劑盒(ELISA)

使用說明書

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒名稱】

大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)定量檢測試劑盒(ELISA)

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒用途】

定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒檢測原理】

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分，再加入酶標(biāo)工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)濃度呈正相關(guān)，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值，計(jì)算樣本中大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)含量。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒試劑盒組成】

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】

1、37℃恒溫箱

2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

3、精密移液器及一次性吸頭

4、蒸餾水

5、一次性試管

6、吸水紙

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒操作步驟】

1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍)；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

8、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s)，37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

12、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒樣本要求】

1、樣本不能含疊氮鈉(NaN₃)，因?yàn)榀B氮鈉(NaN₃)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。

2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)】

1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。

4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

5、本試劑盒定量范圍為6.25-200ng/L，超過此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(6.25-200ng/L范圍內(nèi))，乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本終濃度。

6、若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時間。

7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。

8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號的試劑不得混用。

9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒操作程序總結(jié)】

準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品

加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘

洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘

加入終止液

15分鐘之內(nèi)讀OD值

計(jì)算

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒檢測范圍】

請來電咨詢

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格】

96人份/盒 48人份/盒

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒貯藏】

2-8℃，避光防潮保存。

【大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒有效期】

6個月