人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞 素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻...
素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞
動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)
一節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用簡介
通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)哺乳類動(dòng)物細(xì)胞是生產(chǎn)生物制品的有效方法。2060-70年代,就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。近十?dāng)?shù)年來,由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細(xì)胞介素等生物制品的需求猛增,以傳統(tǒng)的生物化學(xué)技術(shù)從動(dòng)物組織獲取生物制品已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足這一需求。隨著細(xì)胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善,動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)趨于成熟。
所謂動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)(large-scale culture technology)是指在人工條件下(設(shè)定ph、溫度、溶氧等),在細(xì)胞生物反應(yīng)器(bioreactor)中高密度大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細(xì)胞及人二倍體細(xì)胞、cho(中華倉鼠卵巢)細(xì)胞、BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)、Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎傳代細(xì)胞,是貼壁依賴的成纖維細(xì)胞)等,并已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細(xì)胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。
在過去幾十年來,該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展,從使用轉(zhuǎn)瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細(xì)胞培養(yǎng),發(fā)展為生物反應(yīng)器(Bioreactor)進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。一代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)核心問題是難以產(chǎn)業(yè)化或者說是規(guī)模化生產(chǎn):一是在工藝生產(chǎn)時(shí)不能大規(guī)模制備產(chǎn)品;二是非批量生產(chǎn)容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量的不均一性;三是難以對同批生產(chǎn)進(jìn)行生產(chǎn)和質(zhì)量控制。
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞
SUER0511(XR) HES細(xì)胞,人胚皮膚成纖維樣細(xì)胞
SUER0512(XR) AD293 細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0513(XR) CRL-11268細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0514(XR) HEK293-L細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0515(XR) HEK293-T細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0516(XR) GP2-293細(xì)胞,人胚腎上皮包裝細(xì)胞
SUER0517(XR) GP2-293Luc細(xì)胞,人胚腎上皮包裝細(xì)胞
SUER0518(XR) HEK-293細(xì)胞,人胚腎上皮細(xì)胞
SUER0519(XR) 細(xì)胞,人胚腎上皮細(xì)胞
SUER0520(XR) KiMA細(xì)胞,人胚腎上皮細(xì)胞
SUER0521(XR) HEK-293-6e細(xì)胞,人胚腎上皮(轉(zhuǎn)染用)細(xì)胞
SUER0522(XR) 293(HEK-293)細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0523(XR) 293A 細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0524(XR) 293F細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0525(XR) 293FT細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0526(XR) 293H細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0527(XR) 293-L.P.細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0528(XR) 293-mTLR5 細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0529(XR) 293T細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0530(XR) 293T/17細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0531(XR) 293XL-hTLR7細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0532(XR) 293XL-hTLR9細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0533(XR) 2V6.11細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0534(XR) AAV-293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0535(XR) GP-293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞
SUER0536(XR) Phix-293T細(xì)胞,人胚腎(Ad5DNA化)細(xì)胞
SUER0537(XR) 293E細(xì)胞,人胚腎(EBNA1基因修飾)細(xì)胞
SUER0538(XR) 293ET細(xì)胞,人胚腎(SV40T和EBNA1基因修飾)細(xì)胞
SUER0539(XR) H2EL細(xì)胞,人胚胎成纖維細(xì)胞
SUER0540(XR) M-20細(xì)胞,人胚胎成纖維細(xì)胞
SUER0541(XR) M-22細(xì)胞,人胚胎成纖維細(xì)胞
SUER0542(XR) M-7細(xì)胞,人胚胎成纖維細(xì)胞
SUER0543(XR) HEL細(xì)胞,人胚胎肺成纖維細(xì)胞
SUER0544(XR) FC33細(xì)胞,人胚胎腎(Asp-2基因修飾)細(xì)胞
SUER0545(XR) HEH細(xì)胞,人胚胎心臟組織來源細(xì)胞
SUER0546(XR) HFSF細(xì)胞,人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞
SUER0547(XR) CRL-7601細(xì)胞,人皮膚成纖維細(xì)胞
SUER0548(XR) HSF細(xì)胞,人皮膚成纖維細(xì)胞
SUER0549(XR) ECV-304細(xì)胞,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
SUER0550(XR) HUVE-12細(xì)胞,人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
SUER0551(XR) CRL-2922細(xì)胞,人臍靜脈融合細(xì)胞
SUER0552(XR) EA.hy926細(xì)胞,人臍靜脈融合細(xì)胞
SUER0553(XR) HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
SUER0554(XR) HUVEC細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
SUER0555(XR) P69細(xì)胞,人前列腺上皮細(xì)胞
SUER0556(XR) RWPE-1細(xì)胞,人前列腺上皮細(xì)胞
SUER0557(XR) RWPE-2細(xì)胞,人前列腺正常細(xì)胞
SUER0558(XR) HFF-P8細(xì)胞,人前皮膚成纖維細(xì)胞
SUER0559(XR) HFF-P9細(xì)胞,人前皮膚成纖維細(xì)胞
SUER0560(XR) CRL-2713細(xì)胞,人乳腺細(xì)胞
SUER0561(XR) MDA-kb2細(xì)胞,人乳腺細(xì)胞
SUER0562(XR) CRL-2190細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞
SUER0563(XR) HK2細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞
SUER0564(XR) HMC細(xì)胞,人腎小球系膜細(xì)胞
SUER0565(XR) HEF 細(xì)胞,人食道組織來源細(xì)胞
SUER0566(XR) RPE細(xì)胞,人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
SUER0567(XR) D407細(xì)胞,人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
SUER0568(XR) RPE細(xì)胞,人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
SUER0569(XR) ARPE-19細(xì)胞,人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞
SUER0570(XR) HPT-8 細(xì)胞,人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞
SUER0571(XR) HFT-8810細(xì)胞,人胎兒胸腺株細(xì)胞
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞
隨著生物技術(shù)的發(fā)展,迫切需要大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng),特別是培養(yǎng)表達(dá)特異性蛋白的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,以便獲得大量有用的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物。采用玻璃瓶靜置或旋轉(zhuǎn)瓶的培養(yǎng)方法,已不能滿足所需細(xì)胞數(shù)量及其分泌產(chǎn)物。因而必須為工業(yè)化生產(chǎn)一種新的技術(shù)方法。自70年代以來,細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展,種類越來越多,規(guī)模越來越大,較常見的細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器有空氣提升反應(yīng)器,中空纖維管反應(yīng)器,無泡攪拌反應(yīng)器及籃式生物反應(yīng)器等。八十年代以來,人們逐漸開始以生物反應(yīng)器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。
動(dòng)物細(xì)胞是一種無細(xì)胞壁的真核細(xì)胞,生長緩慢,對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術(shù)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞大量培養(yǎng),除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外,有必要建立合理的控制模型,進(jìn)行pH和溶氧(DO)的控制。細(xì)胞生物反應(yīng)器可通過微機(jī)有序地定量地控制加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣、氧氣、氮?dú)夂投趸妓姆N氣體的流量,使其保持的比例來控制細(xì)胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平,使系統(tǒng)始終處于狀態(tài),以滿足動(dòng)物細(xì)胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達(dá)到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內(nèi)氣體中氧氣和氮?dú)獾谋壤齺韺?shí)現(xiàn)控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉(CO2/NaHCO3)緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。
現(xiàn)在,由于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展,且從中得到的蛋白質(zhì)也被證明是安全有效的,因此人們對動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的態(tài)度已經(jīng)發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì)藥物和疫苗,尤其是那些相對較大、較復(fù)雜或糖基化(glycosylated)的蛋白質(zhì)來說,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是的生產(chǎn)方式。60年代初,英國AVRI研究所在貼壁細(xì)胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后,從初的200ml和800ml玻璃容器開始,很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基,補(bǔ)充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后,Wellcome(現(xiàn)為Cooper動(dòng)物保?。┘瘓F(tuán)分布于歐洲、非洲和南美洲8個(gè)的生產(chǎn)廠商,應(yīng)用此項(xiàng)技術(shù)工業(yè)規(guī)?;a(chǎn)口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗,已掌握了5000L的細(xì)胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)。
目前已實(shí)現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品有:口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細(xì)胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細(xì)胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中,口蹄疫疫苗是動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產(chǎn)的主要產(chǎn)品之一。1983年,英國Wellcome公司就已能夠利用動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應(yīng)用SV40為載體,將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá),已生產(chǎn)出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細(xì)胞生產(chǎn)α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應(yīng)器生α、β和γ干擾素;用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應(yīng)器中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等
人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,HUVEC(HUV-EC-C)細(xì)胞
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