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產(chǎn)品詳情

人急性T白血病細胞,Jurkat細胞

  • 產(chǎn)品/服務(wù):人急性T白血病細胞,Jurkat細胞
  • 型 號:人急性T白血病細胞,Jurkat細胞
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2020-04-21
  • 有效期至:長期有效
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產(chǎn)品簡介

人急性T白血病細胞,Jurkat細胞素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。...

產(chǎn)品詳細介紹
 人急性T白血病細胞,Jurkat細胞

素爾細胞庫提供遺傳變異細胞系、正常組織來源細胞系、腫瘤細胞系、工程細胞系、干細胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

人急性T白血病細胞,Jurkat細胞

 成纖維細胞排除法

1、機械刮除法:

是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭(用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲)、或裹少許脫脂棉制成,裝入試管中高壓滅菌后備用(也可用特制電熱燒灼器刮除)。刮除程序為:

(1)標記:鏡下觀察,用不脫色筆在培養(yǎng)瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位;

(2)刮除:棄掉培養(yǎng)液,把無菌膠刮伸入瓶皿中,肉眼或顯微鏡窺視下,刮除無標記空間;

(3)用Hanks液沖洗一兩次,洗除被刮掉的細胞;

(4)注入培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)仍有成纖維細胞殘留,可重復刮除至完全除掉為止

2、反復貼壁法:

根據(jù)腫瘤細胞比成纖維細胞貼壁速度慢的特點,并結(jié)合使用不加血清的營養(yǎng)液,把含有兩類細胞的細胞懸液反復貼壁,使兩類細胞相互分離,操作方法與傳代相同。

(1)待細胞生長達一定數(shù)量后,倒出舊培養(yǎng)液,用胰酶消化后,Hanks 沖洗2次,加入不含血清的培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液;

(2)取編號為此A、B、C三個培養(yǎng)瓶;先把懸液接種入A培養(yǎng)瓶中。置溫箱中靜止培養(yǎng)5~20分鐘后,輕輕傾斜培養(yǎng)瓶,讓液體集中瓶角后慢慢吸出全部培養(yǎng)液,再接種入B培養(yǎng)瓶中后;向A瓶中補充少許完全培養(yǎng)液置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng);

(3)培養(yǎng)B瓶中細胞5~20分鐘后,接處理A的方法,把培養(yǎng)液注入C培養(yǎng)瓶中;再向B瓶中補加完全培養(yǎng)基。

當三個瓶內(nèi)都含有培養(yǎng)液后,均在溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如操作成功,次日觀察可見A瓶主要為成纖維細胞,B瓶兩類細胞相雜,C瓶可能主要為癌細胞。必要時可反復處理多次,直至癌細胞純化為止。

3、消化排除法:

此法曾用于乳癌細胞的培養(yǎng),具體程序是:

(1)先是用0.5%胰蛋白酶和0.02%EDTA(1:1)混合液漂洗培養(yǎng)細胞一次,然后再換成新的混合液繼續(xù)消化,并在倒置顯微鏡下窺視和不時搖動培養(yǎng)瓶,到半數(shù)細胞脫落下來后,便立即停止消化;

(2)把消化液吸入離心管中,離心去上清,吸入另瓶中,加培養(yǎng)液置溫箱中培養(yǎng);向原瓶內(nèi)也補加新的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。用此法處理后,成纖維細胞比腫瘤細胞易先脫落。經(jīng)過幾次反復處理,可能把成纖維細胞除凈。

4、膠原酶消化法:

本法是利用成纖維細胞對膠原酶較為敏感的特點,通過消化進行選擇。

(1)可用0.5mg/ml的膠原酶消化處理,邊消化邊在倒置顯微鏡下窺視,當發(fā)現(xiàn)成纖維細胞被除掉后,即終止消化;

(2)用Hanks洗滌處理一次后,更換新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),可獲純凈腫瘤細胞。如成纖維細胞未被除凈,可再次重復。人急性T白血病細胞,Jurkat細胞

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SUER0059(XR)  NCIH1650-M3細胞,人非小肺癌細胞

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SUER0061(XR)  NCI-H838細胞,人非小肺癌細胞

SUER0062(XR)  NCI-H1650細胞,人非小肺癌細胞

SUER0063(XR)  NCI-H23細胞,人非小肺癌細胞

SUER0064(XR)  NCI-H358細胞,人非小肺癌細胞

SUER0065(XR)  NCI-H157細胞,人非小肺腺癌細胞

SUER0066(XR)  NCI-H2087細胞,人非小肺腺癌細胞

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人急性T白血病細胞,Jurkat細胞

5、其它方法:

有人發(fā)現(xiàn)聚丙烯酰胺有抑制成纖維細胞生長的作用;也有人用聚蔗糖制備成比重1.025~1.085的密度梯度離心液,加入細胞懸液后,在23℃中800g離心 10分種。在比重1.025~1.050層為成纖維細胞,在比重1.050~1.085層為上皮細胞,再經(jīng)過分離進行培養(yǎng)。近也有人應(yīng)用特殊化學物如SOD抑制成纖維細胞生長的方法。

選用上述任何一種方法,都需進行試驗,取得必要經(jīng)驗,找出適合的條件,才能獲得好的效果。

四、提高腫瘤細胞培養(yǎng)存活率和生長率措施

根據(jù)人們的經(jīng)驗,腫瘤細胞在體外不易培養(yǎng),建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養(yǎng)后,常出現(xiàn)以下幾種情況:

完全無細胞游出或移動;

有細胞移動和游出,但無細胞增殖,細胞長時間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代;

六、對腫瘤細胞系或細胞株的評價

已建成的各種腫瘤細胞系或細胞株,無疑都是可用的實驗對象。近年我國已建成的腫瘤細胞系已非常多,并獲得越來越廣泛的應(yīng)用。但根據(jù)研究者的經(jīng)驗,在使用這些細胞系時,應(yīng)持特別審慎態(tài)度,主要是應(yīng)考慮到這些細胞在長期傳代中有否發(fā)生遺傳性改變的可能。眾所周知,長期傳代細胞系染色體核型常是不穩(wěn)定的。另外也可能發(fā)生如基因突變、基因易位或缺失等變化。其結(jié)果可能導致細胞產(chǎn)生生物學性狀上的變動。以近年建成的各種腫瘤細胞系為例,都已傳代少則幾十,多則百代以上后,才確認建成了細胞系。這種情況下很難保證細胞從初代到建成時的性狀仍是一致的。

已如前述,癌細胞在培養(yǎng)中并非能很順利地傳下去,凡已長期傳代的細胞系,都已獲得不死性。當前尚未完全確證所有癌細胞都具有不死性;因此尚難肯定在長期培養(yǎng)中的癌細胞的生物學性狀與體內(nèi)時仍完全相同(包括不死性)。據(jù)上述對用癌細胞系所獲實驗結(jié)果應(yīng)盡量做分析性的結(jié)論,避免做概括性的與體內(nèi)等同的結(jié)論,外推與體內(nèi)等同更是不妥的。廣泛來說,應(yīng)用各種較長時間培養(yǎng)細胞做實驗時,都應(yīng)如此

人急性T白血病細胞,Jurkat細胞


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