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產(chǎn)品詳情

TRIzol,一步法總RNA提取試劑,15596-026

  • 產(chǎn)品/服務(wù):TRIzol,一步法總RNA提取試劑,15596-026
  • 型 號:15596-026
  • 品 牌:Invitrogen
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2020-04-21
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1491
產(chǎn)品簡介

上海素爾生物強勢供應(yīng)TRIzol一步法總RNA提取試劑,保證原裝進口,價格zui低!是各大實驗室的!訂購熱線:...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹
名稱:TRIzol一步法總RNA提取試劑

貨號:15596-026

英文名稱:TRIzol Reagent;TRIzol

保存條件:廠商要求的保存溫度

數(shù)量:現(xiàn)貨供應(yīng),請來電咨詢!

品牌:invitrogen

規(guī)格:100ML

上海素爾生物強勢供應(yīng)TRIzol一步法總RNA提取試劑,保證原裝進口,價格zui低!是各大實驗室的!:

TRIzol一步法總RNA提取試劑簡介 :

TRIzol 是一種總 RNA 抽提試劑,可以直接從細(xì)胞或組織中提取總 RNA 。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞并抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶。

TRIzol 在破碎和溶解細(xì)胞時能保持 RNA 的完整性,因此對純化 DNA 及標(biāo)準(zhǔn)化 RNA 的生產(chǎn)十分有用。

TRIzol一步法總RNA提取試劑的成分 :

TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞,使細(xì)胞中的蛋白,核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì),但不能完全抑制 RNA 酶活性,因此 TRIzol 中還加入了 8 -羥基喹啉、異硫氰酸胍、 β- 巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源 RNase ( RNA 酶)。

   ※ 0.1% 的 8 -羥基喹啉可以抑制 RNase ,與氯仿聯(lián)合使用可增強抑制作用。

   ※ 異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)消失,導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解,核蛋白迅速與核酸分離。

   ※ β- 巰基乙醇的主要作用是破壞 RNase 蛋白質(zhì)中的二硫鍵。

TRIzol一步法總RNA提取試劑的使用方法 :

  用勻漿器將組織磨碎,加入 TRIzol 處理組織。 5 分鐘后加入氯仿,以每分鐘 12000 轉(zhuǎn)離心 5 分鐘,樣品即分成水樣層、中間層和有機層。

   ※ RNA 存在于水樣層中,收集水樣層后可以通過異丙醇沉淀 RNA 來還原。

   ※ 在除去水樣層后,有機層中的 DNA 和蛋白質(zhì)也能相繼以沉淀的方式還原:乙醇能使中間層的 DNA 沉淀析出,在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白質(zhì)。

  每 100ml TRIzol 可以抽提 100 個六孔板中的樣品或 100 個 50-80mg 的組織樣品。無論樣品是人、動物、植物還是細(xì)菌組織,該方法對少量的組織 (50-100mg) 和細(xì)胞 ( 約五百萬個 ) 及大量的組織 (≥1g) 和細(xì)胞 ( 超過一千萬個 ) 均有較好的分離效果。

  每一百萬細(xì)胞用 TRIzol 抽提可得 5-15 微克 RNA ,每毫克組織用 TRIzol 抽提可得 1-10 微克 RNA (產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異)。

   TRIzol 操作上的簡便性允許其同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內(nèi)完成。

   TRIzol 抽提的總 RNA 能夠避免 DNA 和蛋白質(zhì)的污染,故而能夠作 RNA 印跡分析、斑點雜交、 poly(A)+ 選擇、體外翻譯、 RNA 酶保護分析和單分子克?。?PCR )。

   ※ 如果是用于 PCR ,當(dāng)兩條引物位于單一外顯子內(nèi)時,建議用級聯(lián)擴大的 DNase I(Cat. No. 18068) 來處理抽提的總 RNA 。

   ※ TRIzol 試劑能促進不同種屬、不同分子量大小的多種 RNA 的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的 RNA 經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于 7kb 和 15kb 之間的不連續(xù)的高分子量條帶( mRNA 和 hnRNA 成分),兩條核糖體 RNA 條帶位于 ~5 kb (28S) 和 ~2 kb (18S) ,低分子量 RNA 介于 0.1 和 0.3kb 之間 (tRNA, 5S) 。當(dāng)抽提的 RNA 用 TE 稀釋時,其 A260/A280 比值 ≥1.8 。抽提小 RNA 時宜 -70 ℃ 沉淀過夜。

   TRIzol 對人體有害,使用時應(yīng)戴一次性手套,注意防止濺出。

acterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.


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