人結(jié)腸癌細(xì)胞系中癌相關(guān)基因的表達(dá)及表型遺傳修飾的影響

　　目的觀察DNA甲基化和組蛋白乙?；瘜?duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞系癌相關(guān)基因的表達(dá)和細(xì)胞周期的影響。

　　方法培養(yǎng)：

　　2種結(jié)腸癌細(xì)胞系，分別以去甲基化制劑5-氮脫氧胞苷和組蛋白脫乙?；?，抑制劑及丁酸鹽干預(yù)細(xì)胞.提取細(xì)胞總RNA，提取細(xì)胞總RNA,以RT-PCR和定量RTPCR法研究抑癌基因，并運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期變化。結(jié)果正常情況下，細(xì)胞系中均有較弱的p16INK4A和APC表達(dá)，兩種結(jié)腸癌細(xì)胞系p2WAFI表達(dá)缺如,而p53、p73和c-myc、c-Ki-ras以及survivin均表達(dá)。

　　且不同的結(jié)腸癌細(xì)胞系表達(dá)增強(qiáng)明顯時(shí)5-aza-dC干預(yù)的時(shí)間與濃度不同.相反p21wF1仍無明顯表達(dá).值得注意的是這兩個(gè)細(xì)胞系經(jīng)TSA或丁酸鹽處理后,P21WAFl轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào).p53、p73、c-myc、c-Ki-ras和survivin基因在于預(yù)前后表達(dá)無明顯變化.另外,5-aza-dC并不能改變細(xì)胞周期,而TSA或丁酸鹽使細(xì)胞阻滯于G1期.結(jié)論兩種人結(jié)腸癌細(xì)胞系中,p16INK4A和APC基因的表達(dá)均受甲基化調(diào)節(jié);p21wF1基因表達(dá)主要受乙?；{(diào)節(jié),乙酰化使細(xì)胞周期停滯于G1期;而p53、p73、c-myc、c-Ki-ras和survivin基因的表達(dá)不受甲基化或乙?；恼{(diào)節(jié)。