BI胎牛血清使用中遇到的常見問題
發(fā)布時間：2019-08-13瀏覽次數(shù)：897返回列表
BI胎牛血清
在細胞培養(yǎng)中,血清供應了豐富的高分子蛋白,低分子量營養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細胞生長必要的成分如激素和粘附因子.同時,血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分,起到保護細胞的作用.在細胞培養(yǎng)過程中是否選擇添加血清,主要根據(jù)基礎培養(yǎng)基化學成分,培養(yǎng)細胞的類型和培養(yǎng)體系而定.
BI胎牛血清組份的復雜性及作用機理的關聯(lián)性,使得人工無血清培養(yǎng)基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了.但隨著細胞生物學及發(fā)酵制藥工業(yè)的發(fā)展,成本及潔凈程度的要求下,勢必會有新的人工替代試劑出現(xiàn),而這需要我們科研人員的共同努力.
BI胎牛血清：
1. 指標好,內毒素低,利于細胞的生長,不會導致細胞過早的凋亡,有利于下游產物的純化,其他重要指標都處于優(yōu)水平,檢測方法完全符合標準或美國藥典.
2. 品質有保證,BI公司的血清生產完全符合cGMP的生產要求,并通過了ISO13485: 2003和ISO9001: 2008質量認證,符合USDA標準,并有歐洲藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的EDQM證書,可以用于制藥行業(yè).
3. 血清種類齊全,可以滿足所有血清用戶的需求.
4. 多種血清都提供了熱滅活的包裝,減少了實驗室自行熱滅活的工作,并降低了熱滅活對血清的負面影響.
5. 胚胎干細胞專用血清及TET系統(tǒng)專用血清都經過相關實驗嚴格篩選及驗證,出售的FBS原料來源于根據(jù)動物衛(wèi)生組織（OIE）認可的未發(fā)生瘋牛病BSE）疫情的,確保其質量安全.
BI胎牛血清產品說明：
1.專為外泌體研究而設計；
2.由無菌采集健康胎牛血清過濾而成；
3.去除97%以上的胎牛血清內源外泌體；
4.與處理前FBS相同細胞生長速率與形態(tài).
BI胎牛血清使用中遇到的常見問題總結：
一 BI胎牛血清滅活問題.
1 問：加到培養(yǎng)基中的BI牛血清必須滅活嗎？
答：不是必須的,看做什么實驗了.
2 問：BI胎牛血清(Bioind胎牛血清)滅活是56℃ 30分鐘嗎？
答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子. 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min.
3 問：我要做滋養(yǎng)細胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎？
答：進口的一般都已滅活,國產的不一定,zui好還是滅活一下再用較安全.
4 問：我用病毒上清轉染細胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因為血清中可能有些補體和抗體,是不是會影 響轉染？我想未滅活的血清中含些抗體補體可能會和病毒相結合,影響轉染,正確嗎？細胞是單核細胞白血病細胞, 病毒是病毒包裝細胞PT67收集的病毒上清.為什么要用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時,目的是什么？
答：血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清.避免雜蛋白對病毒和宿主 結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據(jù)細胞的狀態(tài)決定.血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補體滅活 ！這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時.
5 問：(1)我買的是BI胎牛血清,要滅活嗎？有些說法是需要,有些說直接解凍后就可以加入到培 養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關系嗎？
答：關于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭議的話題.大多數(shù)實驗室將血清的熱滅活還是作為 常規(guī)來執(zhí)行,因為有兩個作用,一是滅活補體,第二是滅活血清中可能存在的支原體.但是實驗者并沒有考慮熱處 理對血清中的生長因子 氨基酸等成分帶來的負面影響
