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非洲豬瘟檢測整套儀器檢測時的所用材料
發(fā)布時間:2019-05-05瀏覽次數(shù):1986返回列表
非洲豬瘟檢測儀器是基于環(huán)介導等溫技術應用、結合熒光檢測技術的一款雙排8x0.2ml檢測通量、3色熒光檢測通道的開放式設計便攜等溫熒光PCR儀。具有高特異性、高敏感性、簡單、便捷及成本低的特點,已廣泛用于臨床疾病的診斷、流行性細菌/病**的定性/定量檢測、動物胚胎性別鑒定及基因芯片開發(fā)等領域。今天,我們主要介紹非洲豬瘟檢測整套儀器檢測時的所用材料。
ASF的易感動物,主要為家豬、野豬和蜱,通常采集的樣品為家豬、野豬的血液樣品、組織樣品以及蜱三類。田間采集的樣品通常需要經過簡單的預處理,才能進行后續(xù)的檢測、診斷工作。
抗凝全血:用于病毒核酸檢測和病毒抗原檢測。
采血前,在真空采血管或注射器內按比例加入抗凝劑。采集血液,輕輕上下顛倒,使血液與抗凝劑充分混勻,防止血液凝固的同時避免溶血。也可以將血液放入裝有玻璃珠的滅菌瓶內,震蕩脫落纖維蛋白。必要時,可加入雙抗以抑制血源性或采血過程中可能出現(xiàn)的細菌污染。
當血樣用于病毒核酸檢測時,一般不用肝素而選用EDTA作為抗凝劑。(低建議量1mL)。
血清:用于病毒核酸檢測、病毒抗原和抗體檢測。將采好的豬血的注射器或采血管在室溫下傾斜靜止2~4h(防止暴曬),或置于37℃溫箱內1h,待大部分血清析出后,取出血清,必要時經離心分離血清。(低建議量5ml)。
組織樣本:活體采集,采用扁桃體,用于臨床健康動物ASF監(jiān)測。
尸體剖檢ASF發(fā)病動物或死亡動物經解剖取材,包括:ASFV靶器官的采集:脾臟、淋巴結、腎臟、扁桃體。
其他病變組織臟器的采集:采集具有明顯病變的肝臟、肺臟、心臟等組織器官,選取部位在病變和健康組織交界處。
腐敗動物尸體的樣品采集:剖檢取股骨,將附著的肌肉和韌帶等全部剔除,采集骨髓。低建議量5克。
蜱的采集:蜱可進行核酸檢測、抗原檢測和蜱的形態(tài)學鑒定,查找豬圈的墻邊、墻縫、木質或瓦質的屋頂,或挖掘豬圈地面均可能找到蜱,也可查看豬表皮,采集蜱。
注:非洲豬瘟檢測整套儀器檢測時,用于病毒分離和病理學檢測的樣品禁止-20℃保存。