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電動組織勻漿器組織勻漿方法
發(fā)布時間:2018-02-26瀏覽次數(shù):2015返回列表
采用微型直流馬達驅動研磨杵工作,研磨微量組織,時間短見效快。研磨杵重量輕,適合多種滅茵方式,可重復使用,拆卸方便。是專門為各種高水分、高蛋白、高纖維樣品的勻漿和均質而特制的。主要的應用有:牧草/干食品/化學物質的切碎。肉/魚/水果/蔬菜/預制食品(如比薩、凍肉)/化學物質/醫(yī)藥的均質。
可以在很短的時間內處理好冷動的樣品,適用于檢測不穩(wěn)定的分析成分如維生素等。 電動組織勻漿器組織勻漿方法如下:
勻漿 肝每50mg加(裂解液)0.5mlRIPA和5ULPMSF(不能預先加入,否則失效)電動勻漿。
注意保持低溫(埋在冰中),快速勻漿。
將樣品轉移到1.5ml離心管中,12000g離心,4℃,2-3min。
取少量上清進行考馬斯亮蘭595nm定量。
將所有蛋白樣品調至等濃度(用裂解液),加loading buffer后,分成等體積的兩部分(分別于-20℃、-70℃儲存)。
每次上樣前加熱98℃,5min。 (提取磷酸化的蛋白還需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM)。
gel通常在0.5-1h內凝集,過快表示TEMED、APS用量過多,此時膠太硬易龜裂,而且電泳時容易燒膠。
太慢則說明兩種試劑用量不夠或者系統(tǒng)實際不純或實效。