實(shí)驗(yàn)室制備培養(yǎng)基的基本操作方法和注意事項(xiàng)

  一，玻璃器皿的清洗

  在制備培養(yǎng)基的過(guò)程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管，三角瓶，培養(yǎng)皿，燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過(guò)一定的處理，洗刷干凈。有的還要進(jìn)行包裝，經(jīng)過(guò)滅菌等準(zhǔn)備就緒后，才能使用。

  1，新購(gòu)的玻璃器皿

  除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于1～2%的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí)，使游離的堿性物質(zhì)除去，再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿，如大燒瓶，量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸，數(shù)分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。

  2，用過(guò)的玻璃器皿

  凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時(shí)沖洗，吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸，其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì)，以便沖洗。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用，使用時(shí)應(yīng)特別小心，避免濺到衣服，身體和其他物品上。

  二，在實(shí)驗(yàn)室中配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或累積代謝產(chǎn)物的任何營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，都叫做培養(yǎng)基(Media)。由于各類微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同，培養(yǎng)目的和檢測(cè)需要不同，可根據(jù)某種標(biāo)準(zhǔn)，劃分為若干類型。

  1，根據(jù)組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否完全了解來(lái)區(qū)分：

  天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng)，植物或微生物的原料，其成分難以確切知道。主要原料有：牛肉膏，麥芽汁，蛋白胨，酵母膏，玉米粉，麩皮，各種餅粉，馬鈴薯，牛奶，血清等。用這些物質(zhì)配成雖然不能確切知道它的化學(xué)成分，但一般來(lái)講，營(yíng)養(yǎng)是比較豐富的，微生物生長(zhǎng)旺盛，而且來(lái)源廣泛，配制方便，所以較為常用，尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這一類產(chǎn)品穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響。

  合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完全知道的peiyangji，它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類產(chǎn)品化學(xué)成分，重復(fù)性強(qiáng)，但價(jià)格昂貴，而微生物又生長(zhǎng)緩慢，所以它只適用于做一些科學(xué)研究，例如營(yíng)養(yǎng)，代謝的研究。

  c.在合成培養(yǎng)基中加入某種或幾種天然成分;或者在天然培養(yǎng)基中加入一種或幾種已知成分的化學(xué)藥品即成半合成培養(yǎng)基。這一類產(chǎn)品在生產(chǎn)實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室中使用多。

  2，根據(jù)物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分：

  a.液體培養(yǎng)基所配制的是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒(méi)有明顯的固形物，營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。

  b.在液體中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂，明膠，硅膠等，以瓊脂為常用。在實(shí)驗(yàn)室中，它被用作微生物的分離，鑒定，檢驗(yàn)雜菌，計(jì)數(shù)，保藏，生物測(cè)定等。

  c.如果把少量的凝固劑加入到液體中，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例，它的用量在0.2至1%之間。有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力，有時(shí)用來(lái)保藏菌種。

  3，根據(jù)用途來(lái)區(qū)分：

  a.在其中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，如鏈霉素，氯霉素等抑制原核微生物的生長(zhǎng);而制霉菌素，灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長(zhǎng);結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。

  b.為了分離我們所需要的微生物，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種被稱為增殖培養(yǎng)基，常用于菌種篩選和選擇增菌中。

  c.在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別，因而有助開(kāi)快速鑒別某種微生物。這樣的被稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)就是常用的一種。

  有些是具有選擇和鑒別雙重作用。例如食品檢驗(yàn)中常用的麥康凱培養(yǎng)基是一例。它含有膽鹽，乳糖和中性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細(xì)菌的作用選擇性，乳糖和中性紅指示劑能幫助區(qū)別乳糖發(fā)酵腸道菌如大腸桿菌和不能發(fā)酵乳糖的腸道致病菌如沙門氏菌和志賀氏菌。

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