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古朵解析:酶符號抗體的制備辦法

發(fā)布時間:2023-01-06瀏覽次數(shù):872返回列表

  古朵解析:酶符號抗體的制備辦法

  古朵生物 酶符號抗體的制備辦法主要有兩種,即戊二醛交聯(lián)法和過碘酸鹽氧化法。

  (1)戊二醛交聯(lián)法:戊二醛是一種雙功用團試劑,它可以使酶與蛋白質的氨基通過它而聯(lián)合。堿性磷酸一般用此法進行符號。交聯(lián)辦法一步法、兩步法兩種。在一步法中戊二醛直接參加酶與抗體的混合物中,反應后即得酶符號抗體。

  ELISA中常用的酶一般都用此法交聯(lián)。它具有操作簡潔、有效(結合率達60%-70%)和重復性好等優(yōu)點。缺點是交聯(lián)反應是隨機的,酶與抗體交聯(lián)時分子間的份額不嚴格,結合物的巨細也不均一,酶與酶,抗體與抗體之間也有或許交聯(lián),影響效果。兩步法的產(chǎn)品中絕大部分的酶與蛋白質是以1:1的份額結合的,較一步法的酶結合物有助于本底的改進以提高敏感度,但其偶聯(lián)的有效率較一步法低。

  (2)過碘酸鹽氧化法:本法只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的符號常用此法。反應時,過碘酸鈉將HRP分子外表的多糖氧化為醛基很活潑,可與蛋白質上的氨基構成Schiff氏堿而結合。

  按以上辦法制備的酶結合物一般都混有未結合物的酶和抗體。理論上,結合物中混有的游離酶一般不影響ELISA中zui后的酶活性測定,因通過*洗滌,游離酶可被除掉,并不影響顯色。但游離的抗體則不同,它會與酶標抗體競爭相應的固相抗原,從而減少了斷合到固相上的酶標抗體的量。

   上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。