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牛血清白蛋白的作用及常見問題

發(fā)布時(shí)間:2020-08-20瀏覽次數(shù):1291返回列表

    牛血清白蛋白是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生物和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。

    牛血清白蛋白的作用

    牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保護(hù)或載體作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對(duì)多數(shù)底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切g(shù)eng完全,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時(shí),牛血清白蛋白可以使酶geng加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓Q灏椎鞍椎姆磻?yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至geng短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。

    牛血清白蛋白,英文名稱為Bovine Serum Albumin,也稱Bovine albumin,或Cohn Fraction V,簡(jiǎn)稱BSA。BSA有著其廣泛的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,在免疫實(shí)驗(yàn)中常用作封閉劑,包括ELISA、WB(Western Blot)。作為載體蛋白,將其交聯(lián)于半抗原和其他弱抗原可以使它們?cè)诳贵w生產(chǎn)中具有g(shù)eng強(qiáng)的免疫原性。在限制性內(nèi)切酶消化反應(yīng)中,BSA常常被用作一些酶的反應(yīng)穩(wěn)定劑,并且能防止它粘附到管壁和槍頭上。BSA也常用于生物制藥的生產(chǎn)過程或者作為營養(yǎng)物用于細(xì)胞和微生物培養(yǎng)。除此之外,還作為蛋白定量檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品使用。我們提供的BSA產(chǎn)品,使用優(yōu)質(zhì)牛血漿,利用熱休克法(Heat Shock)法制備而成。

    牛血清白蛋白的成分

    血清組成成分雖大部分已為人所知,但還有部分不清楚。在牛血清白蛋白中我們已知的成分大概有以下幾種。

    1、蛋白質(zhì):是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細(xì)胞促進(jìn)細(xì)胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細(xì)胞附著;轉(zhuǎn)鐵蛋白能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用。

    2、多肽:血小板促生長(zhǎng)因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,血清中含量雖很少,但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有一定作用。

    3、激素:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān)。類胰島素生長(zhǎng)因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用。促生長(zhǎng)激素:促細(xì)胞增殖效應(yīng)。

    4、其他成份:氨基酸、葡萄糖、酮酸等對(duì)多種營養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有意義。

    關(guān)于牛血清白蛋白的常見問題

    1、標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白在應(yīng)用時(shí)濃度要適宜,不可太高。牛血清白蛋白組分Vzui-好現(xiàn)配現(xiàn)用,已經(jīng)配好的溶液即使是-20度保存一段時(shí)間后也會(huì)造成你的結(jié)果偏高。

    2、牛血清白蛋白由熱容易凝固,當(dāng)加熱到50°C或以上時(shí),白蛋白相當(dāng)迅速形成疏水性聚集體,不恢復(fù)到冷卻后的單體,在某種程度上低溫聚合預(yù)計(jì)也將會(huì)發(fā)生的,但是在相對(duì)較低的利率。

    3、天然牛血清白蛋白(BSA)的等電點(diǎn)為4.6~5.8,經(jīng)無水乙二胺(EDA)和碳化二亞胺(EDC)反應(yīng),改性后的牛血清白蛋白等電點(diǎn)為8.6