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李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基操作步驟
發(fā)布時間:2018-03-13瀏覽次數:1919返回列表
上海樊克生物科技有限公司,由具有行業(yè)背景和豐富市場經驗的專業(yè)人士組成,致力于為生命科學研究領域提供優(yōu)質產品,為廣大科研工作者提供優(yōu)質服務。既能滿足研發(fā)類客戶對產品種類、包裝、純度的特殊要求,也能滿足生產型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a各個階段的綜合需求
產品名稱:李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基
規(guī)格:BR10ml
包裝:20支/盒
用途:用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng),單增李斯特氏菌顯藍色,外圍有一不透明環(huán)
溫馨提示:僅供科研實驗,不得用于其它用途!歡迎來電咨詢。
配方:(g/L)
營養(yǎng)物質 70.0
顯色劑 1.0
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃
李斯特氏菌添加劑 6.0g
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得佳的結果。
稱取基礎培養(yǎng)基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動,使其乳化均勻,將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為 5mm ,這樣有利觀察不透明環(huán)。
貯存:制備好的固體平板保存于 2-8 ℃,應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8 ℃
失效:干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟:
使用前,把制備好的培養(yǎng)基放置室溫 10-20 分鐘。
1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液;
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養(yǎng) 48 小時;或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 : 10 的比例混勻, 30 ℃培養(yǎng) 24 小時。
3 、取一環(huán)增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上, 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時。
質量控制:
1 、外觀:此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗:在 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時
典型特征:
單增李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-28 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 48 小時 ,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環(huán)。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養(yǎng) 24-48 小時, 平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環(huán)。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
培養(yǎng)基pH 的初步調整:
培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH 的初步調正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養(yǎng)基的終pH ,保證培養(yǎng)基的質量。pH 調正后,還應將培養(yǎng)基煮沸數分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
培養(yǎng)基的分類:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚,組成成分,重復性強,但價格較貴,而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)細菌。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營養(yǎng)豐富,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類,或在合成培養(yǎng)基的基礎上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的需要。